蛋白純化注意事項

1.  選擇表達載體時，要根據所表達蛋白的最終應用考慮。如為方便純化，可選擇融合表達；如為獲得天然蛋白，可選擇非融合表達。

 

2.  融合表達時在選擇外源DNA同載體分子連接反應時，對轉錄和轉譯過程中密碼結構的閱讀不能發生干擾。

3.  菌液OD值要小于1，否則細胞太濃太老，不易破碎，且質粒易丟失。

4.  誘導時間最好做一個梯度，不同蛋白誘導時間需摸索。

5.  誘導溫度適當摸索：25、30℃。

6.  IPTG濃度：一般在1 mM 以內，可適當摸索。

7.  超聲條件可視實際情況改變，只要使菌體裂解充分即可，即菌液清亮不粘稠。